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      4羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒樣本處理及要求
      更新時間:2019-06-26   點擊次數(shù):1061次

      4羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒樣本處理及要求

      1.  血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
      2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
      3.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
      注:標本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

      操作步驟

      1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

      2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

      3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

      4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

      5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

      6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

      7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

       

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