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      ELISA實驗背景深全部呈有色原因及解決辦法
      更新時間:2019-09-25   點擊次數(shù):2874次

      ELISA試劑盒實驗中,背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD<0.2)

      根據(jù)技術(shù)分析,可能存在的原因有一下幾條:

      1、實驗過程中洗滌不充分,洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標記物殘留

        解決辦法:洗液準確配制;充分洗滌,靜置15秒,*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用,不要反復(fù)使用,否則易造成污染。

      2、底物污染,未避光保存,出現(xiàn)顏色

      解決辦法:棄去底物,重新配置

      3、樣品稀釋液污染

        解決辦法:棄去稀釋液,重新配置

      4、吸頭重復(fù)使用,未洗凈或消毒不*

        解決辦法:吸頭盡可能一次性使用

      5、沒有正確封閉

        解決辦法:在標準品稀釋液中加入動物蛋白或延長封閉時間

      6、樣本溶血嚴重

        解決辦法:建議使用非溶血或輕微溶血樣本,嚴重溶血樣本會導(dǎo)致背景偏高。

      7、不正確的孵育時間,溫度(尤其是底物孵育的時間)

        解決辦法:zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。*按照說明書要求

      8、偶聯(lián)抗體(streptavidin-HRP)濃度過高

        解決辦法:按照說明書調(diào)整到合適的濃度

      9、ELISA板子不正確的貯存

        解決辦法:酶標板貯存于2-8 ℃;使用結(jié)合力低點的Elisa板

       

       

       

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