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      人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)Elisa試劑盒樣本處理及要求
      更新時(shí)間:2021-10-05   點(diǎn)擊次數(shù):828次

      17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)Elisa試劑盒樣本處理及要求:


      1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

      2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。


      3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。


      4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到


      100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


      5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。


      6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.


      7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

      巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)

      腫瘤壞死因子-a(TNF-a)

      可溶性細(xì)胞間黏附因子-1(sICAM-1)

      可溶性血管間粘附因子-1(VCAM-1)

      白介素-6(IL-6)

      白介素-8(IL-8)

      高敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)

      內(nèi)皮素(ET)

      一氧化氮(NO)

      血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)

      血管緊張素I (腎素、AngI)

      醛固酮(ALD)

      基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)

      基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)

       氧化低密度脂蛋白(ox_LDL)

      可溶性細(xì)胞表面分化抗原40配體(sCD40L)

      脂聯(lián)素(adiponectin)

      組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)

      纖溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)

      E-選擇素(E-Selectin)

      P-選擇素 CDp62 血小板活化

      同型半胱氨酸

      血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)


       

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